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化生院林硕/李松课题组在斑马鱼基因组 DNA 单碱基精准编辑领域取得新进展
日期:2017-08-03 14:19:12 点击:
  大多数遗传疾病源于单核苷酸的突变(点突变)。目前广泛使用的CRISPR/Cas9方法中,Cas9蛋白含有两个核酸酶结构域,涉及切割DNA两条单链,在目标DNA序列上形成双链断裂。然而,当用于校正单个核苷酸时,标准的CRISPER/Cas9方法通常是很低效的,并且会在目标位置频繁引入随机插入/缺失基因(统称为indels),这主要是细胞对DNA双链断裂的反应结果。
  近日,化生院林硕/李松课题组在《自然通讯》(Nature Communications)上在线发表题为"Programmable base editing of zebrafish genome using a modified CRISPR-Cas9 system" 的研究论文(Nat Commun. 2017 Jul 25;8(1):118. doi: 10.1038/s41467-017-00175-6)
本课题报道了一个可以在斑马鱼基因组中实现精确定点突变的“碱基编辑(base editing,BE)”系统,并利用此系统构建了精确模拟人类疾病突变的斑马鱼模型。BE 系统的工作原理是将胞嘧啶 脱氨酶 APOBEC1 和 Cas9 切口酶融合,使得脱氨酶在CRISPR/Cas9 的引导下,靶向性的对特定碱基进行脱氨作用,从而实现碱基替换。在斑马鱼基因组中多个基因位点实现了高效的碱基替换,效率高达28.5%。
  BE系统作为针对单个碱基的精确基因编辑方法,不论从效率还是从精确性上都高过传统的同源修复介导的基因编辑,代表了一种斑马鱼基因组编辑的新策略。
  本研究由林硕教授和李松副教授指导,张艺翰博士、秦伟博士(共同第一作者)及多位课题组成员合作完成,以上工作得到了深圳市科技创新委员会的资助。(文字/白海鹏)
 
 
 
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